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固相萃取法的应用

[导读]适合用于批量处理样品。采用Florisil固相萃取柱实现了油脂水解后4 种酶解产物TAG、DAG、MAG 及FFA 的依次分离。

目前,分析油脂中sn-2 位脂肪酸常用的方法是: 首先采用胰脂酶对甘油三酯进行酶解,产物包括甘油三酯( TAG) 、甘油二酯( DAG) 、单甘酯( MAG) 、游离脂肪酸( FFA) ,然后将酶解产物经薄层层析( TLC) 对酶解产物中的sn-2 位单甘酯进行分离纯化,甲酯化后用气相色谱( GC) 确定sn-2 位单甘酯脂肪酸组成。但TLC 法对酶解产物进行分离时,操作流程相对复杂,产物的回收率受操作水平影响较大,而固相萃取( SPE) 技术可实现选择性的提取、分离、浓缩三位一体的过程,操作时间短、样品量小、干扰物质少,并具有很好的重现性。随着越来越多的新型吸附剂和新的操作模式的不断涌现,固相萃取技术作为样品前处理技术成为化学分离和纯化的一个强有力工具,从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离,固相萃取技术在多个领域得到了广泛应用。采用氨基( —NH2) 固相萃取柱分离、纯化甘油三酯水解产物中的单甘酯。相对于TLC 法,简化了操作步骤,提高了分析的准确度,适合用于批量处理样品。采用Florisil固相萃取柱实现了油脂水解后4 种酶解产物TAG、DAG、MAG 及FFA 的依次分离。为研究与气相色谱分析相配套的前处理方法,以高效测定油脂中sn -2 位脂肪酸组成及含量,本实验研究了胰脂酶添加量对甘油三酯酶解程度的影响,并优化了酶解产物中sn-2 位单甘酯的分离条件。在最佳分离条件下采用Florisil 固相萃取法对油脂水解后的4 种酶解产物TAG、DAG、MAG、FFA 分离,高温气相色谱法对该方法收集的MAG 的纯度进行分析,并与传统TCL 法测定的油脂sn-2 位脂肪酸结果进行比较,进一步验证该方法的可行性,为sn-2 位脂肪酸组成进而为油脂脂肪酸位置分布的研究提供更方便的前处理方法。

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